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                【流式学习】γδT细胞:虽然我很少,但我很重要

                作者:admin信息来源:达科为日期:2019年09月26日打印字体:  
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                细胞表面抗原受体(T cell receptor, TCR )主要分为αβ TCR γδ TCR 两大类,αβTCR细胞大家都很熟悉了,今天小达君主要跟大家分享一下γδT细胞。γδT细胞是一群固有免疫样的T淋巴细胞,多数表型为 CD3+CD4CD8,主要分布在外周血和粘膜组织中,仅占人外周血 T 细胞的5%~10%??刹灰】?/span>γδT细胞,在受到刺激活化后一样能发挥多种效应功能,包括杀伤感染的细胞和肿瘤细胞、分泌细胞因子和趋化因子、抗原递呈功能及免疫调节功能。
                 γδT细胞的亚群:

                Human通常,人的γδT细胞根据其TCR基因重排过程中TCR δ链的不同主要分为两大亚群:Vδ1T细胞亚群和Vδ2T细胞亚群,其中,与Vδ1T细胞对应的TCRγ链主要为VγI基因家族成员(Vγ2/3/4/5/8),主要分布于黏膜和皮下组织中,在不同的组织中数量不等;Vδ2 T 细胞是γδ T 细胞的主要细胞群,其TCRγ链主要为VγII基因家族成员(Vγ9),因此又叫 Vγ9Vδ2T 细胞,仅存在于灵长类动物和人体内,主要分布于外周血中,占外周血淋巴细胞的0.5% 10%。

                Mouse:小鼠的γδT细胞由于其在体内分布及功能特性的不同可分为不同的亚群。根据γδT细胞在发育过程中TCR基因重排时所选择的链的不同,从结构上可分为Vγ1-Vγ7,七个亚群。
                活化与极化:
                以人的γδT细胞为例,用不同的细胞因子以及磷酸化的抗原刺激后,静息的γδT细胞可以极化为FoxP3+γδTreg、γδT17、γδTfhγδT1,或成为活化的Vδ1T、Vδ2T细胞亚群。

                功能:
                γδT细胞具有多种功能,抗感染、抗肿瘤,在CAR-T治疗中也发挥重要作用。

                流式检测:
                以健康人的冷冻保存的PBMC为样本,通过多色流式染色分析γδT细胞的分化阶段。
                样本类型:健康人的冷冻保存的PBMC
                抗体:

                设门策略:
                (A)
                • 先通过FSC-A/SSC-A圈中淋巴细胞;

                • 通过FSC-A/W排除粘连体;

                • 通过SSC-A/W排除粘连体;

                • 通过EMA死活染料排除掉死细胞;

                • 圈中CD3T淋巴细胞;

                • CD3T淋巴细胞中接着分析CD4T细胞和CD8T细胞的比例;因为人外周血中γδT细胞的表型基本都是CD4CD8,所以圈出CD4CD8双阴性T细胞,准备分析γδT表型;

                • 圈中泛γδT细胞;

                • 分析泛γδT细胞中的Vδ1T细胞和Vδ2T细胞 2个亚群的比例,以及Vδ1Vδ2T双阴性细胞的比例;

                (B)分析Vδ2T细胞中CD27、CD28、CD45RA、CD16等标记表达;
                (C)分析Vδ1T细胞中CD27、CD28、CD45RA、CD16等标记表达。

                γδT细胞的抗体清单:
                BioLegend有很多检测γδT细胞的流式抗体,不同种属,多种荧光标记,满足您的实验需求。

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                APC anti-human  TCR γ/δ

                331212

                100 tests

                B1

                FITC anti-human  TCR γ/δ

                331208

                100 tests

                B1

                PE anti-human  TCR γ/δ

                331210

                100 tests

                B1

                PE/Cy7  anti-human TCR γ/δ

                331222

                100 tests

                B1

                PerCP/Cyanine5.5  anti-human TCR γ/δ

                331224

                100 tests

                B1

                Purified  anti-human TCR γ/δ

                331202

                100 ug

                B1

                LEAF? Purified  anti-human TCR γ/δ

                331204

                500ug

                B1

                Biotin  anti-human TCR γ/δ

                331206

                100ug

                B1

                Alexa Fluor? 647  anti-human TCR γ/δ

                331214

                100 tests

                B1

                Brilliant Violet  421? anti-human TCR γ/δ

                331218

                100 tests

                B1

                Brilliant Violet  510? anti-human TCR γ/δ

                331220

                100 tests

                B1

                PE/Dazzle? 594  anti-human TCR γ/δ

                331226

                100 tests

                B1

                APC/Fire? 750  anti-human TCR γ/δ

                331228

                100 tests

                B1

                Purified anti-human  TCR Vγ9

                331301

                25ug

                B3

                FITC anti-human  TCR Vγ9

                331306

                100 tests

                B3

                PE anti-human  TCR Vγ9

                331308

                100 tests

                B3

                APC anti-human  TCR Vγ9

                331310

                100 tests

                B3

                PerCP anti-human  TCR Vδ2

                331410

                100 tests

                B6

                FITC anti-human  TCR Vδ2

                331406

                100 tests

                B6

                Pacific Blue?  anti-human TCR Vδ2

                331414

                100 tests

                B6

                Alexa Fluor? 700  anti-human TCR Vδ2

                331416

                100 tests

                B6

                APC anti-human  TCR Vδ2

                331418

                100 tests

                B6

                APC/Fire? 750  anti-human TCR Vδ2

                331420

                100 tests

                B6

                PE/Cy7  anti-human TCR Vδ2

                331422

                100 tests

                B6

                PerCP/Cyanine5.5  anti-human TCR Vδ2

                331424

                100 tests

                B6

                Brilliant Violet  421? anti-human TCR Vδ2

                331428

                100 tests

                B6

                Brilliant Violet  605? anti-human TCR Vδ2

                331430

                100 tests

                B6

                Brilliant Violet  510? anti-human TCR Vδ2

                331432

                100 tests

                B6

                PE/Dazzle? 594  anti-human TCR Vδ2

                331426

                100 tests

                B6

                Brilliant Violet  711? anti-human TCR Vδ2

                331412

                100 tests

                B6

                PE anti-human  TCR Vδ2

                331408

                100 tests

                B6

                Purified  anti-human TCR Vδ2

                331402

                100 ug

                B6

                Biotin  anti-human TCR Vδ2

                331404

                100 ug

                B6

                Purified  anti-mouse TCR γ/δ

                107502

                500ug

                UC7-13D5

                Brilliant Violet  421? anti-mouse TCR γ/δ

                118119

                125ul

                GL3

                FITC anti-mouse  TCR γ/δ

                118106

                200 ug

                GL3

                Biotin  anti-mouse TCR γ/δ

                118103

                50 ug

                GL3

                LEAF? Purified  anti-mouse TCR γ/δ

                107506

                500 ug

                UC7-13D5

                Alexa Fluor? 488  anti-mouse TCR γ/δ

                107512

                100 ug

                UC7-13D5

                APC anti-mouse  TCR γ/δ

                118116

                100 ug

                GL3

                PE anti-mouse  TCR γ/δ

                118108

                100 ug

                GL3

                FITC anti-mouse  TCR γ/δ

                107504

                500 ug

                UC7-13D5

                PE anti-mouse  TCR γ/δ

                107508

                100 ug

                UC7-13D5

                Purified  anti-mouse TCR γ/δ

                118101

                100 ug

                GL3

                LEAF? Purified  anti-mouse TCR γ/δ

                118114

                500 ug

                GL3

                PerCP/Cyanine5.5  anti-mouse TCR γ/δ

                118118

                100 ug

                GL3

                Brilliant Violet  421? anti-mouse TCR γ/δ

                118120

                50 ug

                GL3

                PE/Cy7  anti-mouse TCR γ/δ

                118124

                100 ug

                GL3

                Alexa Fluor? 488  anti-mouse TCR γ/δ

                118128

                100 ug

                GL3

                Brilliant Violet  605? anti-mouse TCR γ/δ

                118129

                50 ug

                GL3

                Brilliant Violet  510? anti-mouse TCR γ/δ

                118131

                50 ug

                GL3

                Alexa Fluor? 647  anti-mouse TCR γ/δ

                118134

                100 ug

                GL3

                APC/Fire? 750  anti-mouse TCR γ/δ

                118136

                100 ug

                GL3

                APC anti-mouse  TCR Vγ1.1/Cr4 Antibody

                141108

                100 ug

                2.11

                FITC anti-mouse  TCR Vγ1.1/Cr4 Antibody

                141104

                100 ug

                2.11

                PE anti-mouse  TCR Vγ1.1/Cr4 Antibody

                141106

                100 ug

                2.11

                PerCP/Cyanine5.5  anti-mouse TCR Vγ1.1/Cr4 Antibody

                141112

                100 ug

                2.11

                Pacific Blue?  anti-mouse TCR Vγ1.1/Cr4 Antibody

                141110

                100 ug

                2.11

                Purified  anti-mouse TCR Vγ1.1/Cr4 Antibody

                141102

                100 ug

                2.11

                APC anti-mouse  TCR Vγ2 Antibody

                137708

                100 ug

                UC3-10A6

                FITC anti-mouse  TCR Vγ2 Antibody

                137704

                200 ug

                UC3-10A6

                PE anti-mouse  TCR Vγ2 Antibody

                137706

                200 ug

                UC3-10A6

                APC anti-mouse  TCR Vγ3 Antibody

                137506

                100 ug

                536

                PE anti-mouse  TCR Vγ3 Antibody

                137504

                100 ug

                536

                APC anti-mouse  TCR Vδ6.3 Antibody

                154806

                100 ug

                C504.17C

                FITC anti-mouse  TCR Vδ6.3 Antibody

                154808

                100 ug

                C504.17C

                PE anti-mouse  TCR Vδ6.3 Antibody

                154804

                100 ug

                C504.17C

                Purified  anti-mouse TCR Vδ6.3 Antibody

                154802

                500 μg

                C504.17C

                PE anti-mouse  TCR Vδ4 Antibody

                134905

                25 μg

                GL2

                PE anti-mouse  TCR Vγ1.1 + Vγ1.2 Antibody

                142704

                100 ug

                4B2.9

                Purified  anti-mouse TCR Vγ1.1 + Vγ1.2 Antibody

                142702

                100 ug

                4B2.9

                PE anti-rat TCR  γ/δ

                202605

                50 ug

                V65

                参考文献:
                • Gamma-delta(γδ) T cells: friend or foe in cancer development? J Transl Med.
                • Six-of-the-best:unique contributions of γδ T cells toimmunology. Nat Rev Immunol.
                • OMIP‐020:Phenotypic characterization of human γδ T‐cells by multicolor flow cytometry. Cytometry A.
                往期内容链接:
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