四步搞定RNA检测！Stellaris? RNA FISH“极简”指南

什么是Stellaris^TM RNA FISH?

Stellaris^TM RNA FISH（荧光原位杂交）是一种RNA可视化方法，可使用荧光显微镜同时定位和定量细胞水平上单个RNA分子。一套Stellaris^TM RNA FISH探针由多达48条独特的探针组成，每个探针都标有一个荧光基团，它们共同结合靶标RNA产生可见的光点。

Stellaris^TM RNA FISH操作简单，无需分离、纯化或扩增，当天即可出结果，并且在样品类型、种属和应用方面通用。Stellaris^TM RNA FISH探针可标记多种不同的染料，可以同时检测不同的靶标RNA。

Stellaris^TM RNA FISH操作步骤

步骤A：准备样品
将培养的、贴壁的或切片的样品转移到1号盖玻璃上，并用酒精透化。不需要蛋白酶处理！
注意：针对不同样本、组织等制备的具体操作可登录以下网址查询。

https://www.biosearchtech.com/support/resources/stellaris-rna-fish/stellaris-protocols
步骤B：探针杂交
杂交可以在37°C标准实验室培养箱中4-16h完成。
步骤C：清洗样本
去除杂交缓冲液、短暂的洗涤液孵育能够去除多余的探针，此步骤的总时间为1-1.5h。

步骤D：图像采集
使用标准荧光显微镜进行样品成像。我们建议使用宽视场荧光显微镜，但其他成像平台也可以与Stellaris^TM RNA FISH探针一起使用。图像处理可使用在线工具完成，该工具将Z Stack图像转换为最大强度投影图像。

步骤A：准备样品
将培养的、贴壁的或切片的样品转移到1号盖玻璃上，并用酒精透化。不需要蛋白酶处理！
注意：针对不同样本、组织等制备的具体操作可登录以下网址查询。

https://www.biosearchtech.com/support/resources/stellaris-rna-fish/stellaris-protocols
步骤B：探针杂交
杂交可以在37°C标准实验室培养箱中4-16h完成。
步骤C：清洗样本
去除杂交缓冲液、短暂的洗涤液孵育能够去除多余的探针，此步骤的总时间为1-1.5h。

步骤D：图像采集
使用标准荧光显微镜进行样品成像。我们建议使用宽视场荧光显微镜，但其他成像平台也可以与Stellaris^TM RNA FISH探针一起使用。图像处理可使用在线工具完成，该工具将Z Stack图像转换为最大强度投影图像。

可实现多重检测

Stellaris^TM RNA FISH探针可结合可见光谱中的各种荧光基团，包括LGC Biosearch Technologies的CAL Fluor?系列和Quasar?系列染料，用于多重分析。多重检测中的染料选择在很大程度上取决于成像平台上可用的滤光片，可以设计一个包含DAPI核染色和三个Stellaris^TM RNA FISH探针组的检测，使得这些探针组合光谱重叠最小。

多种实验方法结合

Stellaris^TM RNA FISH还可以与qPCR、DNA FISH、IHC（免疫组化）、IF（免疫荧光）和western blotting等技术结合，提供更多检测信息。