酶是一类极为重要的生物催化剂。之前小达君给大家安利了只针对线性RNA的RNase R(RNaseR——RNase家族的“外貌协会成员”),今天继续给大家介绍另一位RNase家族的“奇葩成员”,它能够从5′-三磷酸化的RNA依次地移除γ和β磷酸基,简直就像RNA的“脱磷剂”,可以一层一层地“剥开”RNA的磷~
RNA 5′ Polyphosphatase是Epicentre科学家发现的一个Mg2+依赖的磷酸水解酶。该酶能够从5′-三磷酸化的RNA (如初级RNA转录本) 依次地移除γ和β磷酸基:
5′ pppN—OH 3′ → 5′ pN—OH 3′ + 2 Pi
带有5′-双磷酸化末端的RNAs也可以通过RNA 5′ Polyphosphatase转化成5′-单磷酸酶化的RNA:
5′ ppN—OH 3′ → 5′ pN—OH 3′ + Pi
RNA Polyphosphatase对含有5′帽子(例如, 5′ m7GpppN—OH 3′)或5′单磷酸化末端(5′ pN—OH 3′)的RNA没有活性。但是NTPs和dNTPs都是该酶的底物,产生相应的NMPs和dNMPs + 无机磷:
(d)NTP → (d)NMP + 2Pi
应用
将5′三磷酸化的RNA转换成5′单磷酸化的RNA,用于使用T4 RNA Ligase的5′-RNA连接标记反应;
分析RNA的5′末端结构;
用于制备RNA底物,后续可用于Terminator? 5′-磷酸依赖性外切核酸酶的降解反应。
产品信息
产品名称 |
规格 |
货号 |
商城报价 |
RNA 5' Polyphosphatase |
200 U |
RP8092H |
¥1,845 |
美国Lucigen公司成立于1998年,提供各类用于分子生物学相关产品,可以使研究者成功克隆较难克隆的基因,其在2016年收购了Illumina旗下Epicentre产品线。目前产品类别主要包括:体外转录、基因克?。˙AC克隆试剂盒)、感受态细胞(TG1噬菌体文库构建感受态)、体外扩增、转座子突变、蛋白表达、文库构建等。