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                提高BAC,Fosmid文库拷贝数,您只差了一支诱导剂

                作者:admin信息来源:达科为日期:2018年03月26日打印字体:  
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                首先安利一下Epicentre的专利技术——CopyControl?克隆系统,能够让您共享单拷贝和高拷贝的优点。CopyControl?克?。菏紫纫缘タ奖葱问缴?,单拷贝可以确保插入稳定及成功克隆编码基因序列;在需要的时候,通过诱导液诱导成高拷贝克隆,以便下游应用所需。这一系统可以用来构建PCR克隆,对于BAC,Fosmid文库等大型质粒格外有用。

                CopyControl?克隆系统有两个重要成分,相辅相成,缺一不可:

                1.CopyControl? pCC1和pCC2载体

                pCC1和pCC2载体含有两个复制起始位点:单拷贝的大肠杆菌F-因子复制子和诱导型的高拷贝oriV。其中OriV的启动,需要trfA基因产物,由CopyControl?的另一个重要成分——TransforMax? EPI300 E.coli菌株提供。

                图1 pCC1载体图谱

                2.TransforMax? EPI300 E.coli

                这是一种工程菌株,含有受诱导启动子控制的trfA基因,在诱导的条件下可以提供启动oriV所需要的trfA基因产物。 

                图2 TransforMax? EPI300 E.coli菌株基因型

                 

                CopyControl?克隆诱导步骤



                图3 CopyControl?克隆流程

                 

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